Existe un interés en el aislamiento, identificación y cuantificación de polifenoles y componentes activos de flores de nuez (WMF) para investigar y explicar sus actividades farmacológicas. Existen diferentes métodos de extracción reportados en la literatura, aplicados y probados para obtener extractos de fenólico de WMF ricos en nutrientes y / o fitoquímicos.
Contenido fenólico y actividad antioxidante
En un estudio realizado por el Equipo BCBS (Biotechnologies et Chimie des Bioressources Pour la Santé), de la Universidad de la Rochelle, Francia, se caracterizo el perfil fitoquímico de las flores de nuez (Juglans regia L.). Se investigó sistemáticamente las condiciones experimentales necesarias para lograr altas eficiencias de extracción de fitoquímicos activos de este subproducto; a través de una extracción asistida por ultrasonidos accesible y eficiente.
Para determinar las condiciones ideales de extracción, se combinaron tres parámetros (solvente, tiempo de extracción y contenido de agua en el solvente) con análisis fitoquímicos y herramientas estadísticas. Los extractos más prometedores se caracterizaron además tanto cualitativa como cuantitativamente en términos de contenido individual de polifenólicos y tocoferol.
El contenido de fitoquímicos en diferentes partes de una matriz vegetal varía mucho. La síntesis de fitoquímicos puede estar regulada por la genética, incluido el cultivo. Además por factores ambientales como el tipo de suelo, la exposición al sol, la lluvia, la agricultura orgánica o convencional y el tiempo de cosecha. En particular, el estrés ambiental puede afectar significativamente la síntesis de polifenoles. Además, el contenido fenólico de los extractos de plantas está sujeto a métodos de extracción, condiciones experimentales y diferentes formas de presentar los resultados.
Analizando los extractos de WMF, se cuantificaron un total de 10 polifenoles, con seis polifenoles (ácido p-cumárico, ácido ferúlico, hiperósido, isoquercitrina, quercitrina, quercetina) cuantificados mediante el método LC-MS validado. Además de cuatro polifenoles (catequina, ácido siríngico, ácido gálico y ácido protocatecuico) mediante el método LC-MS / MS.
Compuesto fenólico bioactivo individual
Con base en los polifenoles evaluados, la quercetina y sus derivados de quercetina (hiperósido, quercitrina e isoquercitrina) fueron los compuestos más representativos. La mayor parte de la cantidad total de tocoferol en WMF fue proporcionada por gama-tocoferol, una isoforma altamente biológicamente activa. Los extractos con el mayor contenido polifenólico (N20) y tocoferol (N15), respectivamente, se examinaron más a fondo para determinar sus actividades inhibidoras de enzimas sobre la tirosinasa y la glucosidasa. Estas son enzimas clave involucradas en enfermedades relacionadas con la edad.
También se realizó la cuantificación de tocoferoles. Los tocoferoles son las formas naturales de la vitamina E esencial soluble en grasa, una potente molécula antioxidante y antiinflamatoria. Basándose en datos científicos, la Autoridad Europea de Seguridad Alimentaria (EFSA) reconoció que la vitamina E podría proteger el ADN, las proteínas y los lípidos del daño oxidativo.
La muestra obtenida después de 50 min de tiempo de extracción y con 20% de agua en acetona, mostró las mejores concentraciones de tocoferol. La mayor parte de la cantidad total de tocoferol en WMF fue proporcionada por gama-tocoferol. Se reveló que esta isoforma es el inhibidor más activo del crecimiento tumoral, posiblemente atrapando especies reactivas de oxígeno y nitrógeno e induciendo la apoptosis.
Conclusiones sobre la obtención de mayor contenido fenólico
Los resultados indicaron que el extracto con mayor contenido de polifenoles tenía una mayor capacidad para inhibir enzimas, lo que probablemente está relacionada con los polifenoles. Esto porque se ha demostrado que esta clase de compuestos inhibe las actividades de varias enzimas. Además, se evaluaron los potenciales antioxidantes de los dos extractos en cultivos celulares. A concentraciones no citotóxicas, ambos extractos mostraron buenas actividades antioxidantes en cultivos celulares, disminuyendo la concentración basal y de estrés oxidativo inducido por H2O2.
Este estudio aumenta el conocimiento sobre las flores de la nuez y describe el contenido de tocoferol y el potencial anticanceroso de esta matriz vegetal. La potencia de los extractos justifica una mayor investigación científica. De esta manera comprender la biodisponibilidad y los mecanismos de acción detrás de las actividades biológicas de las flores masculinas de Juglans regia.
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